HPLC(High Performance Liquid Chromatography) 시료 전처리

HPLC(High Performance Liquid Chromatography) 전처리는 샘플의 복잡성을 줄이고 정확한 분석을 위해 수행되는 과정입니다. 아래에 일반적으로 사용되는 HPLC 전처리 방법 중 일부를 설명해 드리겠습니다.

1. 샘플 여과 (Filtration)

시료 내의 입자나 불용물을 제거하기 위해 여과 과정을 수행합니다.

여과 시 사용되는 필터는 적절한 입경 크기를 가지고 있어 샘플 중 유용한 성분을 보존하면서 불용물을 제거할 수 있어야 합니다.

2. 샘플 추출 (Sample Extraction)

분석 대상 화합물이 복잡한 행렬에 포함되어 있는 경우, 적절한 추출 방법을 사용하여 분석에 적합한 형태로 추출합니다.

일반적인 추출 방법으로는 액체-액체 추출, 고체 단상 추출, 액체-액체 분배 등이 있습니다.

3. 증발 (Evaporation)

대량의 용매가 함유된 샘플의 경우, 증발 단계를 통해 용매를 제거하고 농축시킵니다.

진공 증발기나 회분 증발기 등을 사용하여 적절한 조건에서 용매를 제거할 수 있습니다.

4. 표준물질 추가 (Standard Addition)

분석 대상 화합물의 양을 정확하게 측정하기 위해, 시료에 미리 알려진 양의 표준물질을 첨가하여 분석을 수행합니다.

이를 통해 시료 행렬의 효과를 보상하고 정확한 정량 분석 결과를 얻을 수 있습니다.

5. pH 조절 (pH Adjustment)

pH가 분석에 영향을 미칠 수 있는 경우, 분석에 적합한 pH 범위로 조절합니다.

산 또는 염기를 사용하여 pH를 조절할 수 있으며, pH 전극 또는 pH 민감 인디케이터를 사용하여 pH 값을 확인할 수 있습니다.

6. 필터링 (Solid-Phase Extraction)

샘플 내의 원하는 화합물을 분리하거나 불용물을 제거하기 위해 고체 단상 추출 (Solid-Phase Extraction)을 수행합니다.

흡착제로는 실리카, C18 등이 일반적으로 사용되며, 이를 통해 원하는 화합물을 분리하고 불용물을 제거할 수 있습니다.

전처리 단계는 샘플의 특성과 실험의 목적에 따라 다양하게 조정될 수 있습니다. 적절한 전처리 단계를 선택하여 샘플의 복잡성을 줄이고 HPLC 분석의 정확도와 신뢰성을 향상할 수 있습니다.